詳細(xì)內(nèi)容
產(chǎn)品名稱：免疫組化試劑盒（兔鼠通用）
產(chǎn)品規(guī)格：50T，100T
儲(chǔ)存溫度：-20℃ , 一年有效
本產(chǎn)品僅限于業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品。
原理：DAB染色液是特別敏感的二步法免疫組化試劑盒，適合與兔或鼠源一抗配用。其主要過程為，一抗與切片中的靶抗原形成抗原抗體復(fù)合物，酶標(biāo)羊抗鼠/兔IgG聚合物二抗(以多聚葡聚糖分子為骨架，辣根過氧化物酶與羊抗鼠/兔IgG形成的聚合物)與抗原抗體復(fù)合物中的一抗結(jié)合，再利用辣根過氧化物酶催化二氨基l苯a(DAB)在抗原部位形成棕色顯色。
試
劑盒組成：酶標(biāo)羊抗兔/抗鼠IgG聚合物二抗4℃，5mL;DAB顯色劑(100x)A4℃，100ul;DAB顯色緩沖液B4℃，10mL;3%過氧化氫，10mL;
使用方法：DAB顯色緩沖液：DAB顯色劑(100x)=100:1;DAB顯色工作液液C=A+B;
其他自備試劑：修復(fù)液，pbs，BSA等
操作流程如下(僅供參考)：
石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲bⅠ15min-二甲bⅡ15min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-85%酒精5min-75%酒精5min-蒸餾水洗。
抗原修復(fù)：組織切片置于盛滿EDTA抗原修復(fù)緩沖液(PH8.0)(其他抗原修復(fù)液可以根據(jù)情況選擇)的修復(fù)盒中于微波爐內(nèi)進(jìn)行抗原修復(fù)，中火8min至沸，停火8min保溫再轉(zhuǎn)中低火7min，此過程中應(yīng)防止緩沖液過度蒸發(fā)，切勿干片。自然冷卻后將玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次，每次5min。
阻斷內(nèi)源性過氧化物酶：切片放入3%過氧化氫溶液(30%雙s水：純水=1:9)，室溫避光孵育25 min，將玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次，每次5min。
非特異性封閉:切片稍甩干后用組化筆在組織周圍畫圈(防止抗體流走)，在圈內(nèi)滴加用3%BSA或者用封閉液均勻覆蓋組織，室溫封閉30min。
加一抗：輕輕甩掉封閉液，在切片上滴加按一定比例配好的一抗工作液(可選擇PBS或者一抗稀釋液配制一抗工作液)，切片平放于濕盒內(nèi)4°C孵育過夜。(濕盒內(nèi)加少量水防止抗體蒸發(fā))
加二抗：玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次，每次5min。切片稍甩干后在圈內(nèi)滴加與一抗相應(yīng)種屬的酶標(biāo)羊抗鼠/兔IgG聚合物二抗覆蓋組織，室溫孵育50min。
DAB顯色：玻片置于PBS(PH7.4)中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次，每次5min。切片稍甩干后在圈內(nèi)滴加新鮮配制的DAB顯色工作液液C，顯微鏡下控制顯色時(shí)間，陽性為棕黃色，自來水沖洗切片終止顯色。
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原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
標(biāo)簽：
免疫組化試劑盒（兔鼠通用）
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