詳細內(nèi)容

細胞名稱：MDCK犬腎細胞；MDCK
組織來源：腎細胞
培養(yǎng)條件：DMEM-H:Dulbecco＇sModifiedEagle＇sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)10%FBS
形態(tài)：貼壁；上皮樣；多角
細胞來源：1958年，MadinSH和DarbyNB從表觀正常的成年雌性科克獵犬的腎建立了MDCK細胞株。角蛋白陽性。該細胞曾被用于研究β淀粉體蛋白的形成及其蛋白水解產(chǎn)物的分類。
產(chǎn)品用途：提供用于科研的穩(wěn)定細胞系。
運輸：凍存的細胞干冰運輸，復(fù)蘇的細胞冰袋運輸。

MDCK犬腎細胞 培養(yǎng)方法：
收到細胞后，在倒置顯微鏡下觀察整個細胞生長情況：
如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶，留10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
如果細胞已長滿（達80-90%）。即可進行傳代，具體步驟如下：
a，棄去培養(yǎng)液，用PBS洗1-2次。
b，向瓶內(nèi)加入1.0-2.0ml胰蛋白酶液，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓，迅速拿回操作臺，吸取胰蛋白酶，加含有6ml 含10%血清的培養(yǎng)液，輕輕吹打細胞。
c，加入等量的的培養(yǎng)液，輕輕吹打混勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)
d，傳代比例：1:2-1:3

溫馨提示：培養(yǎng)瓶里面的培養(yǎng)液是加入高藥物濃度的，為800ng/ml。我們采取緩慢增加藥物的梯度的方法。具體步驟是，先加含200ng/mlTaxol藥物的培養(yǎng)液，放入培養(yǎng)箱，這段時間會有小部分細胞懸浮起來，屬于正常情況，通過換液可以去掉，等細胞待長滿就可以消化傳代了，這時可以一直用含藥物培養(yǎng)液來消化培養(yǎng)細胞，一兩代之后就可以將藥物濃度提高到500ng/ml，兩代后可以將藥物濃度提高至高水平800ng/ml，含藥物培養(yǎng)液用于細胞培養(yǎng)都沒有問題，凍存的時候就不要在凍存液里加藥物了。

MDCK犬腎細胞 保存和適用范圍：
客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮原代細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復(fù)蘇。

（MDCK細胞）犬腎細胞復(fù)蘇的原則：
在實際操作中，凍存細胞要進行復(fù)蘇，再培養(yǎng)傳代。復(fù)蘇細胞一般采用快速融化法。以保證細胞外結(jié)晶快速融化，以避免慢速融化水分滲入細胞內(nèi)，再次形成胞內(nèi)結(jié)晶損傷細胞。

原創(chuàng)作者：上海遠慕生物科技有限公司

標簽：MDCK犬腎細胞   

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