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　　1、真菌鏡檢

是jian單也是很有價(jià)值的實(shí)驗(yàn)室診斷方法。其優(yōu)點(diǎn)在于簡(jiǎn)便、快速，無(wú)菌部位的陽(yáng)性結(jié)果可直接確定真菌感染。但是由于陽(yáng)性率較低，陰性結(jié)果亦不能排除診斷。直 接鏡檢對(duì)于淺表和皮下真菌感染有幫助。在皮膚刮屑、毛發(fā)或甲標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)皮膚癬菌、念珠菌和馬拉色菌的成分可提供對(duì)相應(yīng)真菌病的可靠診斷。如在無(wú)菌體液的 直接鏡檢中發(fā)現(xiàn)真菌成分常可確立深部真菌病的診斷，例如在腦脊液中檢測(cè)到帶莢膜的新生隱球菌酵母細(xì)胞，或外周血涂片中檢測(cè)到莢膜組織胞漿菌細(xì)胞。但一般在 有菌部位則只有發(fā)現(xiàn)大量真菌菌絲方才有意義，通過(guò)直接鏡檢一般可以區(qū)分念珠菌、隱球菌、暗色真菌、毛霉（接合菌）等菌的感染，進(jìn)一步明確鑒定菌種需要通過(guò) 培養(yǎng)鑒定來(lái)完成。

2、真菌培養(yǎng)

真菌培養(yǎng)是實(shí)驗(yàn)室檢查中的重要環(huán)節(jié)，培養(yǎng)出致病真菌是進(jìn)一步鑒定菌種的提條件。真菌培養(yǎng)步是從臨床標(biāo)本中培養(yǎng)真菌的初代培養(yǎng)，初代培養(yǎng)后進(jìn)一步進(jìn)行 分離純化培養(yǎng)和鑒定培養(yǎng)。不同致病真菌每一步所采用的培養(yǎng)基，培養(yǎng)時(shí)間和培養(yǎng)溫度存在一定的差異。常規(guī)的真菌培養(yǎng)需要在28-30°C溫度下培養(yǎng)3-4 周，一般初代培養(yǎng)選用沙氏培養(yǎng)基（SDA）或者馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基（PDA），采用試管培養(yǎng)，一般同時(shí)培養(yǎng)兩管，其中一管可添加抗生素（氯霉素或慶大霉素均 可）。在培養(yǎng)1周內(nèi)，應(yīng)該每天觀(guān)察有無(wú)真菌生長(zhǎng)。一般培養(yǎng)4周后，如果無(wú)真菌生長(zhǎng)可報(bào)陰性。發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)出真菌，直接挑取少量菌體或者小培養(yǎng)后，用乳酸酚棉蘭 制成涂片顯微鏡下觀(guān)察，結(jié)合菌落大體形態(tài)，典型菌種可直接報(bào)告種屬。不典型菌種根據(jù)基本表現(xiàn)，采用適當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)鑒定培養(yǎng)基，標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)條件培養(yǎng)，必要時(shí)要結(jié)合 生理學(xué)和分子生物學(xué)方法進(jìn)行鑒定。

3、真菌鑒定

對(duì)常見(jiàn)致病真菌要掌握的鑒定原則是先區(qū)分酵母菌和霉菌。

如果初代培養(yǎng)基上培養(yǎng)出酵母樣菌落，在鑒定應(yīng)進(jìn)行分離純化。在去除細(xì)菌和其他真菌污染，區(qū)分混合感染后，對(duì)純菌落進(jìn)行鑒定。酵母菌鑒定主要根據(jù)形態(tài)學(xué)特 征和生理生化特點(diǎn)，按照一定的流程進(jìn)行。先根據(jù)菌落顏色進(jìn)行分類(lèi)。臨床為常見(jiàn)的是白色或奶白色菌落，這類(lèi)菌進(jìn)一步做芽管試驗(yàn)，若芽管試驗(yàn)是陽(yáng)性則為白 念珠菌，若陰性則通過(guò)Vitek YBC或API20C及玉米吐溫瓊脂上培養(yǎng)的形態(tài)特征來(lái)鑒定。另外，還可以應(yīng)用念珠菌顯色瓊脂、尿素酶試驗(yàn)等試驗(yàn)來(lái)輔助鑒定。

霉菌的鑒定非常復(fù)雜，有許多標(biāo)準(zhǔn)包括形態(tài)學(xué)特征、溫度耐受性，放線(xiàn)-菌酮抗性、雙相性、營(yíng)養(yǎng)需求、蛋白分解活動(dòng)以及水解尿素能力等�，F(xiàn)代分類(lèi)學(xué)鑒定方法主要 依據(jù)分生孢子的個(gè)體發(fā)生過(guò)程結(jié)合其他特征來(lái)進(jìn)行鑒定。初代培養(yǎng)后根據(jù)形態(tài)學(xué)特征一般可鑒定到屬的水平，再依據(jù)不同真菌的鑒定要求，采用標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基和培養(yǎng)條 件進(jìn)一步完成菌種鑒定。例如：曲霉屬鑒定時(shí)需要采用標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基，即察氏培養(yǎng)基和麥芽瓊脂，25℃培養(yǎng)7天后與曲霉形態(tài)鑒定檢索表對(duì)應(yīng)得到正確的結(jié)果。