支原體簡介與支原體污染的問答
閱讀次數(shù):630 發(fā)布時間:2021/5/14 10:39:27
支原體是種大小介于細(xì)菌和病毒之間(小直徑0.2um)并獨立生活的微生物.約有1%可通過濾菌器。支原體無細(xì)胞壁形態(tài)呈高度多形性.可為圓形、絲狀或梨形。 支原體形態(tài)多變,在光境下不易看清內(nèi)部結(jié)構(gòu)。電鏡下觀察支原體膜為三層結(jié)構(gòu).其中央有電干密度大的密集顆粒群或絲狀的中心束。支原體多吸附或散在于細(xì)胞表面和細(xì)胞之間。橫斷面與細(xì)胞微絨毛相似,但微絨毛電子密度比支原體小,且中央無顆粒群或中央束。
支原體代謝需固醇類物質(zhì)、部分種類需要精氨酸、O 2或葡萄糖,每種支原體都有自身持點。多數(shù)支原體適合于偏堿條件下生存(PH7.6—8.0),對酸耐受性差。對熱比較敏感,對般抗生素不敏感。 支原體污染細(xì)胞后.培養(yǎng)液可不發(fā)生混濁.多數(shù)情況下細(xì)胞病理變化輕微或不顯著,細(xì)微變化也可由于傳代、換液而緩解.因此易被忽視。但個別嚴(yán)重者,可致細(xì)胞增殖緩慢.甚至從培養(yǎng)器皿脫落。
1、應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?
細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和支原體。 主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。 嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之好方法。
2、 如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時, 應(yīng)如何處理?
直接滅菌后丟棄之。
3、支原體 (mycoplasma) 污染的細(xì)胞, 是否能以肉眼觀察出異狀?
不能。 除有經(jīng)驗之家外, 大多數(shù)遭受支原體污染的細(xì)胞株, 無法以其外觀分辨之。
4、支原體污染會對細(xì)胞培養(yǎng)有何影響?
支原體污染幾乎可影響所有細(xì)胞之生長參數(shù),代謝及研究之任數(shù)據(jù)。故進(jìn)行實驗,必須確認(rèn)細(xì)胞為 mycoplasma-free,實驗結(jié)果之?dāng)?shù)據(jù)方有意義。
5、偵測出細(xì)胞株有支原體污染時, 該如何處理?
直接滅菌后丟棄,以避免污染其它細(xì)胞株。