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確保培養(yǎng)基平皿的質(zhì)量需注意的事項(xiàng)
閱讀次數(shù):671 發(fā)布時(shí)間:2021/2/23 10:04:08
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當(dāng)科學(xué)技術(shù)飛速發(fā)展,有關(guān)微生物檢測(cè)的高科技方法可謂如若瀚海。雖然培養(yǎng)皿檢測(cè)微生物是個(gè)古老的、傳統(tǒng)的檢測(cè)方法,但由于它具有可以直接分離鑒別樣品、操作方便、結(jié)果可靠等優(yōu)點(diǎn),所以至仍廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥衛(wèi)生,臨床檢驗(yàn)、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物、食品、化妝品、工農(nóng)業(yè)、環(huán)保等眾多域。在藥品質(zhì)量控制、安全評(píng)價(jià)和疾病診斷中尤其發(fā)揮著重要的作用。

培養(yǎng)基是微生物試驗(yàn)的基礎(chǔ),直接影響微生物試驗(yàn)結(jié)果,而成品預(yù)裝培養(yǎng)基平皿是培養(yǎng)基中的種,是由脫水培養(yǎng)基完全溶解于水中,矯正PH值,然后滅菌和分裝于平皿而成。無(wú)論是實(shí)驗(yàn)室配制的培養(yǎng)基平皿或商品化的成品預(yù)裝培養(yǎng)基平皿,其質(zhì)量都依賴于其制備的整個(gè)過程。采用不適宜方法制備的培養(yǎng)基將影響微生物的生長(zhǎng)或復(fù)蘇,從而影響試驗(yàn)結(jié)果的可靠性。所以要確保培養(yǎng)基平皿的質(zhì)量,需特別注意以下事項(xiàng):

1、選擇適宜的培養(yǎng)基制備方法,不得使用結(jié)塊或顏色發(fā)生改變的脫水培養(yǎng)基。

2、培養(yǎng)基滅菌應(yīng)按照生產(chǎn)商提供的或經(jīng)驗(yàn)證的參數(shù)進(jìn)行,避免采用不適當(dāng)?shù)募訜岷蜏缇鷹l件,而引起培養(yǎng)基顏色變化、透明度降低、瓊脂凝固力或pH值的改變。

3、應(yīng)確定每批培養(yǎng)基滅菌后的pH值(冷卻至室溫25℃測(cè)定)。若培養(yǎng)基處方中未列出pH值的范圍,除非經(jīng)驗(yàn)證表明培養(yǎng)基的pH值允許的變化范圍很寬,否則,pH值的范圍不能超過規(guī)定值±0.2。

4、成品預(yù)裝培養(yǎng)基平皿應(yīng)確保無(wú)菌,并且平皿不得破裂,盡量避免形成氣泡,固體培養(yǎng)基表面不得產(chǎn)生裂縫或漣漪,在冷藏溫度下不得形成結(jié)晶,不得污染微生物等。

5、培養(yǎng)基升溫滅菌過程中溫度上升緩慢或滅菌后降溫過慢,可能導(dǎo)致培養(yǎng)基的過熱或過度滅菌,定程度上會(huì)降低微生物培養(yǎng)基促生長(zhǎng)的質(zhì)量,所以成品預(yù)裝培養(yǎng)基平皿應(yīng)通過微生物促生長(zhǎng)試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。

6、用于環(huán)境監(jiān)控的培養(yǎng)基平皿必須特別防護(hù),好采用三層包裝和終端滅菌。不建議采用實(shí)驗(yàn)室自制的培養(yǎng)皿通過100%預(yù)培養(yǎng)后用于潔凈區(qū)環(huán)境采樣,因?yàn)轭A(yù)培養(yǎng)過程中失水會(huì)影響微生物生長(zhǎng),且還存在培養(yǎng)皿被污染的可能。

7、貯藏和運(yùn)輸條件應(yīng)使成品培養(yǎng)基低限度的失去水分并提供機(jī)械保護(hù)、避光保存。含瓊脂培養(yǎng)基平皿不得在0℃或0℃以下存放,冷凍可能破壞凝膠特性。

培養(yǎng)基平皿制備過程質(zhì)量控制和貯藏條件是提供優(yōu)質(zhì)培養(yǎng)基的保證。潔凈區(qū)環(huán)境浮游菌、沉降菌及表面微生物監(jiān)測(cè)用培養(yǎng)基般采用胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基(TSA),必要時(shí)可加入適宜的中和劑;當(dāng)監(jiān)測(cè)結(jié)果有疑似真菌或考慮季節(jié)因素影響時(shí),可增加沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(SDA)。
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