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研究內(nèi)容：無菌檢測培養(yǎng)基靈敏度檢測試驗

研究機構(gòu)：國家藥典委員會

刊發(fā)表時間及刊物：中國藥典·三部（2015）1101

實驗目的

在做無菌檢測時，需對所用培養(yǎng)基的靈敏度進行檢測，2015版藥典提供了培養(yǎng)基靈敏度檢測的試驗方法：通過接種一定濃度的指定菌株至待測培養(yǎng)基中，在規(guī)定培養(yǎng)條件下進行培養(yǎng)，通過觀察菌株的生長狀況從而判斷待測培養(yǎng)基的靈敏度。

1.對試驗菌株的要求

培養(yǎng)基靈敏度檢測試驗所用菌株代次不得超過5代，菌種保藏中心的干粉制劑計為0代，后續(xù)每進行一次傳代菌種代次加1。

2.菌種的制備

將用于試驗的菌株接種至對應培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，獲取菌株培養(yǎng)物，詳情如下：



將按上述要求獲得的新鮮培養(yǎng)物制成含菌量小于100Cfu/ml的菌懸液。

3.培養(yǎng)基接種

按下表要求將上述菌懸液接種至相應培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，觀察生長狀況。




4.結(jié)果判定

接種后每日觀察培養(yǎng)基內(nèi)菌株生長情況，空白對照應無菌生長，其余長勢良好則培養(yǎng)基靈敏度檢測判為合格。

討論

1.用新鮮培養(yǎng)物制備小于100cfu/ml的菌懸液，若用涂板的方法進行計數(shù)則計數(shù)結(jié)果之后。

2.菌懸液接種至待檢培養(yǎng)基后的培養(yǎng)條件不明確只規(guī)定了時間但為規(guī)定培養(yǎng)溫度。

3.接種后的培養(yǎng)觀察，其中“長勢良好”主觀性強。