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    紙片擴(kuò)散法

    該法是將含有定量抗菌藥物的濾紙片貼在已接種了測試菌的瓊脂表面上，紙片中的藥物在瓊脂中擴(kuò)散，隨著擴(kuò)散距離的增加，抗菌藥物的濃度呈對數(shù)減少，從而在紙片的周圍形成濃度梯度。同時，紙片周圍抑菌濃度范圍內(nèi)的菌株不能生長，而抑菌范圍外的菌株則可以生長，從而在紙片的周圍形成透明的抑菌圈，不同的抑菌藥物的抑菌圈直徑因受藥物在瓊脂中擴(kuò)散速度的影響而可能不同，抑菌圈的大小可以反映測試菌對藥物的敏感程度，并與該藥物對測試菌的MIC呈負(fù)相關(guān)。

    稀釋法

    稀釋法藥敏試驗可用于定量測試抗菌藥物對某一細(xì)菌的體外活性，分為瓊脂稀釋法和肉湯稀釋法。實驗時，抗菌藥物的濃度通常經(jīng)過倍比（lg2）稀釋，能抑制待測菌肉眼可見生長的藥物濃度成為*小抑菌濃度（MIC），一個特定抗菌藥物的測試濃度范圍應(yīng)該包含能夠檢測細(xì)菌的解釋性折點（敏感、中介和耐藥）的濃度，同時也應(yīng)該包含質(zhì)控參考菌株的MIC.

    實驗準(zhǔn)備

    2.1　藥敏片的準(zhǔn)備：購買或自制

    2.1.1　制備方法：取新華1號定性濾紙，用打孔機(jī)打成6毫米直徑的圓形小紙片。取圓紙片50片放入清潔干燥的青霉素空瓶中，瓶口以單層牛皮紙包扎。經(jīng)15磅15-20分鐘高壓消毒后，放在37℃溫箱或烘箱中數(shù)天，使完全干燥。

    2.1.2　抗菌藥紙片制作：在上述含有50片紙片的青霉素瓶內(nèi)加入藥液0.25毫升，并翻動紙片，使各紙片充分浸透藥液，翻動紙片時不能將紙片搗爛。同時在瓶口上記錄藥物名稱，放37℃溫箱內(nèi)過夜，干燥后即密蓋，如有條件可真空干燥。切勿受潮，置陰暗干燥處存放，有效期3-6個月。

    2.2　藥液的制備（用于商品藥的試驗）：按商品藥的使用治療量的比例配制藥液；如商品藥百病消按其說明量治療量0.01%飲水，可按這個比例配制藥液，可取10毫克加入10毫升的水中混勻。此稀釋液即為用于做藥敏試驗的藥液。

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