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小鼠丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)測定試劑盒要提高陽性值,先要確定兩種酶標(biāo)二抗使用的是不是同一批包被的板,因為雖然是相同的抗原,可能兩次包被不一樣。如果是同一批板,出現(xiàn)陽性值不高的這種情況,只能說明酶標(biāo)二抗失活了,要買新的二抗,一定要按說明書上的稀釋倍數(shù)稀釋,如果陰性對照有顏色很可能是沒有封閉好。
小鼠丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)測定試劑盒試劑實驗測定:
一、定性測定
(1)陽性判定值法(cut-off value,CO值):一般為陰性對照的平均A值加一個常數(shù),試劑制備嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)化,要先計算出陽性對照A值平均數(shù)和陰性對照A值平均數(shù)。標(biāo)本A值≥CO值即為陽性。
(2)抑制率法:在競爭抑制法中結(jié)果可用抑制率表示。
抑制率(%)=(A陰性對照A- A待測)/陰性對照X100%,一般以抑制率≥50%為陽性
二、半定量測定
結(jié)果一般以滴度表示。將標(biāo)本連續(xù)稀釋后,進(jìn)行ELISA檢測,在陽性臨界值以上的稀釋度即為該標(biāo)本的“滴度"。
三、定量測定
即用己知量的標(biāo)準(zhǔn)品作一系列稀釋后進(jìn)行ELISA測定,與待測標(biāo)本同時進(jìn)行測定,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,結(jié)果以絕對量或活性單位表示。
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