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腦脊液樣本該如何收集與保存!
閱讀次數(shù):2661 發(fā)布時間:2015/12/10 10:12:02
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    現(xiàn)如今,ELISA實驗樣本已不僅僅局限于血清、血漿組織了,更多時候廣大科研者開始提取腦脊液作為研究對象。那么,腦脊液該如何提取跟保存呢?假如您心中也帶著這個疑惑,那么請跟隨我司技術部王老師一起獲知其中的奧秘吧!

    腦脊液的采集

    1.狗、兔腦脊液的采集通常采取脊髓穿刺法:動物輕度麻醉后,側臥位固定,使頭部及尾部向腰部盡量彎曲,剪去第七腰椎周圍的被毛。消毒后操作者在動物背部用左手姆、食指固定穿刺部位的皮膚,右手持腰穿刺針垂直刺入,當有落空感及動物的后肢跳動時,表明針已達椎管內(蛛網(wǎng)膜下腔),抽去針芯,即見腦脊液流出。如果無腦脊液流出,可能是沒有刺破蛛網(wǎng)膜。輕輕調節(jié)進針方向及角度,如果腦脊液流的太快,插入針芯稍加阻塞,以免導致顱內壓突然下降而形成腦疝。

    2.大鼠腦脊液的采集可采用枕大孔直接穿刺法

    在大鼠麻醉后,頭部固定于定向儀上。頭頸部剪毛、消毒,用手術刀沿縱軸切一縱行切口(約2cm)用剪刀鈍性分離頸部背側肌肉。為避免出血,*深層附著在骨上的肌肉用手術刀背刮開,暴露出枕骨大孔。由枕骨大孔進針直接抽取腦脊液。抽取完畢逢好外層肌肉、皮膚。刀口處可撒些磺胺藥粉,防止感染。采完腦脊液后,應注入等量的消毒生理鹽水,以保持原來腦脊髓腔的壓力。

    腦脊液的保存條件

    1.如果實驗要求只是測定其中的蛋白含量的話,采集腦脊液后,離心1500g(左右)/10min(左右)。然后收集上清,分裝保存于液氮[*佳選擇]或-80度即可。(如果短時間內就使用,-20度也可以,但能保存于-80度)。整個過程是冰上操作。

    2.保存過程中,避免反復凍溶,防止蛋白降解。



    標簽:腦脊液 ELISA樣本


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