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技術(shù)文獻

peg誘導(dǎo)細胞融合失敗因素
閱讀次數(shù):535 發(fā)布時間:2024/6/11 14:25:09
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細胞融合技術(shù)是細胞工程中的一項核心基礎(chǔ)技術(shù)。細胞融合技術(shù)在基因定位、基因表達產(chǎn)物、腫瘤診斷核治療、生物新品種培育及單克隆抗體技術(shù)等域有著非常廣泛的應(yīng)用景。單克隆抗體技術(shù)就是通過細胞融合技術(shù)發(fā)展起來的,在生命科學(xué)研究和應(yīng)用方面產(chǎn)生了重大影響。生物技術(shù)發(fā)展也很快,細胞融合技術(shù)也在發(fā)展,到底哪一種技術(shù)是常用,教材也沒有統(tǒng)一說法,所以也很難說哪種常用。

利用聚乙二醇(PEG)誘導(dǎo)細胞融合,可以促使兩個不同基因型的細胞或原生質(zhì)體融合形成一個雜種細胞。

影響因素具體如下:

1.PEG的分子量與濃度

細胞融合效果與PEG的分子量及其濃度成正比;但PEG的分子量越大、濃度越高,對細胞的毒性也就越大。為了兼顧二者,在實驗時常常采用的PEG分子量一般為1000-4000,濃度一般為40-60%。

2.PEG的PH值

經(jīng)驗證,PEG的PH值在8.0-8.2之間融合效果/好。

3.PEG的處理時間

處理時間越長,融合效果越好,但對細胞的毒害也就越大。故一般將處理時間限制在1分鐘之內(nèi)。本實驗中細胞融合后無需繼續(xù)培養(yǎng),故處理時間可適當(dāng)放寬至數(shù)分鐘。

4.融合時的溫度

由于生物膜的流動性與溫度成正比,故細胞的融合效果也與溫度成正比。因此,為了獲得更好的融合效果,在細胞可能承受的溫度范圍內(nèi)可適當(dāng)提高處理的溫度。對于哺乳動物的細胞,一般采用的溫度為38-40℃。

原創(chuàng)作者:上海遠慕生物科技有限公司

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