為避免結(jié)果假陰性、假陽性以及出現(xiàn)誤差,需要實驗室人員及時發(fā)現(xiàn)實驗室存在的不足并加以改正,這樣才能為臨床的進步治療提供精準的數(shù)據(jù)。
產(chǎn)生污染主要有以下4個原因:
①是PCR擴增產(chǎn)物的污染。這也是常見的污染原因。PCR產(chǎn)物經(jīng)反復(fù)多次的擴增,其復(fù)制量遠遠超過PCR的檢測限,所以即使是微量的污染也足以造成實驗結(jié)果假陽性。
②試劑的污染。在試劑的配制過程中,接觸了污染的容器、移液器、槍頭、溶液等物導(dǎo)致試劑被污染。
③待測樣品被污染。放置樣品的容器被污染或由于容器密封不嚴導(dǎo)致樣品與外界接觸被污染;其次在核酸提取過程中使用了被污染的移液器或槍頭導(dǎo)致樣品被污染;另外,某些樣品中含有病毒,若彌散到空氣中則有可能形成交叉污染。
④氣溶膠污染。若氣溶膠中包含病毒等污染物擴散至空氣中有可能造成PCR產(chǎn)物污染。氣溶膠是由空氣與液體表面摩擦而產(chǎn)生的,開蓋、晃動反應(yīng)管及污染加樣器的反復(fù)吸樣都可形成氣溶膠從而導(dǎo)致交叉污染。據(jù)計算個氣溶膠顆?珊48 000 拷貝,因此,應(yīng)尤其重視由氣溶膠導(dǎo)致污染的問題。PCR 實驗室只要出現(xiàn)了污染,之的結(jié)果報告就變?yōu)闊o效而且也無法進行其他的實驗操作。必須找出并徹底清除污染源,才能得到準確有效的實驗結(jié)果。
為了提高實驗室的檢測質(zhì)量,避免實驗室污染以及確保實驗室的生物安全,規(guī)范有效的管理是實現(xiàn)這切的根本措施。但有時會出現(xiàn)管理不到位甚至是疏忽的地方,比如隨意出入實驗室,甚至逆行;沒有按照規(guī)范穿戴口罩、鞋套;試驗期間緩沖間兩側(cè)門同時打開;實驗完畢后忘記開紫外燈消毒等。這些不規(guī)范的行為為實驗室的安全和污染埋下了隱患,從而影響檢驗結(jié)果的準確性。因此,有效的管理和實驗室操作規(guī)程的規(guī)范執(zhí)行尤為重要。
原創(chuàng)作者:上海遠慕生物科技有限公司