技術(shù)文獻(xiàn)
抗體檢測試劑盒除了正確的使用方式,在使用過程中還需要注意以下幾點:
1、使用過的測試卡、口腔采樣拭子、收集瓶等器材不要隨意亂扔,應(yīng)嚴(yán)格按照《醫(yī)療廢物管理條例》以及《全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范》的要求執(zhí)行。
2、檢測前請認(rèn)真閱讀說明書全文,并按照要求仔細(xì)操作。
3、某些抗病毒藥物治療愛滋病患者和艾滋病患者晚期由于其免疫功能嚴(yán)重受損或異常,不以準(zhǔn)確判斷。
4、用于本產(chǎn)品檢測的樣本必須嚴(yán)格按照說明書的樣本收集方式采集。
5、陽性結(jié)果的顏色深淺與樣本中的HIV抗體水平無直接聯(lián)系。
6、抗體檢測試劑盒為一次性體外診斷試劑,不可重復(fù)使用;過期產(chǎn)品請勿使用。
7、采樣前若有咀嚼口香糖、大量漱口水、飲食或抽煙等可能影響采樣質(zhì)量及檢測結(jié)果的行為,應(yīng)考慮適當(dāng)推遲采樣時間,至少在上述行為發(fā)生15分鐘后方能采樣。
8、呈陽性結(jié)果的受檢者須按照國家HIV管理規(guī)范,送HIV確認(rèn)實驗室進(jìn)行確認(rèn)。
9、首次采集樣本后,如30分鐘內(nèi)再次采集樣本進(jìn)行檢測,可能會造成靈敏度降低,因此應(yīng)避免30分鐘內(nèi)重復(fù)取樣。
10、試驗應(yīng)在4-30℃條件下進(jìn)行,低溫保存的檢測卡需要恢復(fù)室溫后再打開,以免吸潮。
11、檢測過程中,口腔采樣拭子、計時器或手表、一次性手套和生化污物桶是必要的使用物品,請自行準(zhǔn)備。
12、抗體檢測試劑盒打開鋁箔袋后應(yīng)盡快使用。
在使用前與室溫平衡,再進(jìn)行測定。在elisa試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后。抗原抗體反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育(incubation),有人稱之為孵育,在ELISA試劑盒中似不恰當(dāng)。
ELISA試劑盒屬固相免疫測定,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標(biāo)本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會,只有較貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。
如果對試劑準(zhǔn)備不太注意,在實驗時將試劑從冰箱中拿出來即用,而忽略了這種做法有可能影響后面溫育時間不夠的問題影響后面的操作。測定中試劑的準(zhǔn)備較為關(guān)鍵的是,在實驗開始前,將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20min以上后,以使試劑盒
2. 當(dāng)混合蛋白溶液時應(yīng)盡量輕緩,避免起泡。
3. 洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。
4. 一次加樣時間較好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
5. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,較好做復(fù)孔。
6. 如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高,請先稀釋后再測定。
7. 在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液工作液時,請以相應(yīng)的稀釋液配制,ELISA試劑盒不能混淆。
8. 底物請避光保存。
9、控制好每一步的操作時間。
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