培養(yǎng)基是微生物試驗(yàn)的基礎(chǔ)，直接影響微生物的試驗(yàn)結(jié)果，而pH值又是培養(yǎng)基的重要監(jiān)控項(xiàng)目。這是因?yàn)槲⑸锏纳L(zhǎng)不僅依賴豐富的營(yíng)養(yǎng)，還需要一個(gè)適宜的pH環(huán)境，只有在適宜的pH環(huán)境下微生物才能正常生長(zhǎng)繁殖或體現(xiàn)其生物特性，因此培養(yǎng)基pH值是否符合要求直接影響微生物檢驗(yàn)結(jié)果。在培養(yǎng)基配制過(guò)程中，滅菌過(guò)程對(duì)培養(yǎng)基pH值影響尤為重要。我們常�？梢园l(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)基在滅菌后pH值有差異，一般滅菌后pH值都會(huì)有所下降，這是為什么呢？
本文我們將和大家簡(jiǎn)單聊一下滅菌后pH值變化的那些事。
滅菌的時(shí)間和溫度
在高壓濕熱滅菌時(shí)，長(zhǎng)時(shí)間的高溫會(huì)對(duì)培養(yǎng)基產(chǎn)生很多不利的影響，例如會(huì)導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)物質(zhì)分解、營(yíng)養(yǎng)成分改變以及pH值變化，進(jìn)而影響微生物生長(zhǎng)。同時(shí)還可能引起培養(yǎng)基顏色變化、透明度降低、瓊脂凝膠強(qiáng)度變化等。培養(yǎng)基在滅菌過(guò)程中，滅菌的溫度和時(shí)間，高壓滅菌器升溫、降溫的速率，滅菌容器的容積和裝載方式等因素都對(duì)培養(yǎng)基的滅菌有著重要影響。
培養(yǎng)基的成分
在培養(yǎng)基的配制過(guò)程中我們會(huì)發(fā)現(xiàn)，同樣的滅菌溫度和時(shí)間，同樣的體積和裝量的不同培養(yǎng)基，在滅菌后pH值變化不同，有的培養(yǎng)基pH值變化較多，有的培養(yǎng)基pH值變化較少。這是因?yàn)椴煌囵B(yǎng)基的成分不盡相同，而不同的成分在滅菌過(guò)程中對(duì)培養(yǎng)基pH值有著不同的影響。糖類和蛋白胨是培養(yǎng)基中常見(jiàn)的兩種重要成分，那么這兩種成分分別對(duì)培養(yǎng)基滅菌后pH值有著什么樣的影響呢？
糖類，例如葡萄糖、乳糖等作為碳源被微生物所利用。糖類在高溫條件下會(huì)產(chǎn)生有機(jī)酸使培養(yǎng)基pH值下降。一般情況下，培養(yǎng)基含糖量越高，滅菌后pH值下降越多。如果過(guò)度滅菌pH值變化會(huì)更加明顯。同時(shí)，糖類在高溫滅菌時(shí)容易焦化，使培養(yǎng)基顏色加深。
蛋白胨一般作為培養(yǎng)基氮源，為微生物的生長(zhǎng)提供營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。蛋白胨在培養(yǎng)基滅菌時(shí)還能對(duì)培養(yǎng)基的pH值變化起到一定的緩沖作用。一般含胨量高的培養(yǎng)基，滅菌后pH值變化相對(duì)較小。
另外，若培養(yǎng)基成分中含有緩沖劑，如磷酸氫二鉀等，也可以減少培養(yǎng)基滅菌后pH值的變化。
測(cè)量pH值時(shí)的溫度
同一培養(yǎng)基在不同溫度下測(cè)得的pH值也會(huì)有一定差異，一般培養(yǎng)基的pH值會(huì)隨著測(cè)量時(shí)溫度的升高而降低。培養(yǎng)基滅菌之后未完/全冷卻時(shí)，測(cè)量的pH值一般會(huì)偏低，這是由于溫度升高時(shí)溶液中的游離離子數(shù)增多，測(cè)得的pH值較低；反之，當(dāng)溫度降低時(shí)游離離子數(shù)減少，測(cè)得的pH值較高。通常我們?cè)跍y(cè)定培養(yǎng)基pH值時(shí)，溫度控制在25℃左右。
原創(chuàng)作者：上海遠(yuǎn)慕生物科技有限公司
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